Metoda oznaczania mutacji KMT2A w próbkach pobranych od pacjentów cierpiących na ostrą białaczkę limfoblastyczną na podstawie badania stosunków intensywności pasm 1008/1040 cm-1 w komórkach izolowanych i utrwalonych roztworem aldehydu

Patent udzielony na terenie Europy i Stanów Zjednoczonych (EP22461622, US18380230)

Wynalazek dotyczy innowacyjnej metody diagnostycznej wykorzystującej spektroskopię Ramana do identyfikacji podtypu ostrej białaczki limfoblastycznej z rearanżacją genu KMT2A. Metoda polega na utrwaleniu limfoblastów roztworem aldehydu (0,5% glutaraldehydu), a następnie pomiarze spektralnym stosunku intensywności całkowej pasm Ramana przy 1040 cm⁻¹ i 1008 cm⁻¹. Wartość tego stosunku ≥0,95 wskazuje na obecność rearanżacji KMT2A. Technologia wykorzystuje laser o długości fali 532 nm z obiektywem wodnym i umożliwia analizę pojedynczych komórek w zakresie spektralnym 500-1800 cm⁻¹. Jest to pierwsza metoda spektroskopowa pozwalająca na specyficzną identyfikację tego agresywnego podtypu białaczki w sposób szybki, bezmarkerowy i nieinwazyjny.

• Szybkość diagnostyki – wyniki dostępne w ciągu kilku godzin vs dni/tygodni dla standardowych metod molekularnych
• Niskie koszty – brak potrzeby drogich przeciwciał, sond FISH czy sekwencjonowania
• Prostota wykonania – możliwość automatyzacji i przeprowadzania przez przeszkolony personel bez specjalistów spektroskopii
• Metoda bezmarkerowa – nie wymaga użycia znaczników, barwników czy przeciwciał
• Nieinwazyjność – analiza bez niszczenia próbki
• Wysoka specyficzność – jednoznaczna identyfikacja KMT2A-r vs inne podtypy ALL
• Uniwersalność próbek – możliwość analizy materiału z krwi obwodowej lub szpiku kostnego
• Brak wymagań mitotycznych – w przeciwieństwie do kariotypowania klasycznego

Gotowy produkt. Przeprowadzono pełne badania walidacyjne na próbkach klinicznych od pacjentów z różnymi podtypami BCP-ALL, zwalidowano protokół utrwalania, parametry pomiarowe spektrometru i analizę statystyczną wyników.

• Hematologia pediatryczna – diagnostyka białaczek u niemowląt
• Onkohematologia – różnicowanie podtypów ALL dla personalizacji leczenia
• Diagnostyka molekularna – uzupełnienie/alternatywa dla FISH, RT-PCR i sekwencjonowania NGS
• Ośrodki niereferencyjne – umożliwienie precyzyjnej diagnostyki molekularnej bez zaawansowanego zaplecza laboratoryjnego
• Monitorowanie choroby resztkowej
• Medycyna personalizowana – identyfikacja pacjentów wymagających intensywnej chemioterapii
• Badania kliniczne – stratyfikacja pacjentów w protokołach leczenia białaczek
• Centrum przeszczepów – kwalifikacja do transplantacji szpiku kostnego

@:  sylwia.grzelak@umed.lodz.pl, tel.: 502 447 575